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      如何选择高效液相色谱仪中的反相色谱缓冲液
      发布时间:2019-12-21   点击次数:431次
       
        通过HPLC分离的样品可根据其在分离系统(或流动相)中的状态分成中性样品和离子样品所谓中性样品是在分离条件下不能离解的化合物,而离子化合物可以离解离子。换句话说,离子样品指的是酸碱化合物,而中性化合物是其它化合物。
        反相色谱(RPC)主要是基于待分离化合物的极性。在其它类似条件(分子量、空间结构)下,强极性物质的保留值较小。对于中性样品,其极性取决于化合物本身,但对于离子化合物,其极性可以通过调节其是否离解或离解程度来调节,从而调节其保留值、分辨率和主链效应(一般来说,保留值的提高将导致骨干效应的提高)。
        在分离含有少量化合物的样品的情况下,通常可行的是使用无盐流动相(无论全部或部分化合物不是中性的)。由于需要分离的化合物较少,分离度的要求不太重要,通过调节流动相的洗脱容量和流速可以实现保留值的调节。...此时,您需要尝试使用SALT移动阶段,即使用缓冲区。但是,用无盐流动相分离多组分样品比较困难。当然,如果样品中的所有化合物都是中性化合物,则很难使用盐流动相,但这次较少。因此,如果无盐缓冲液在分离多组分样品时效果不好,应首先考虑盐的流动相。
        缓冲液是在一定条件下提供共轭酸碱对并稳定pH值的溶液。利用缓冲液控制分离过程中的pH值,控制化合物的离解程度,从而调节化合物的极性。  
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